具体设计规则：合成PNA序列的长度一般不超过18个碱基，接头、氨基酸和标记物不在此范围内。PNA序列可以在N端或C端添加一个赖氨酸或半胱氨酸。嘌呤含量方面，富含嘌呤的PNA容易发生聚合反应且水溶性较差。为避免聚合反应，嘌呤含量需限制在60%以下。例如：GATTAGCAGTCTACG（可行，嘌呤含量<60%），连续的嘌呤不得超过4个，而鸟嘌呤则限制在3个以内。例如：ATTAGGGGCATCTAC（不可行，连续4个G），CTAGATAGAAGGTTC（不可行，连续6个嘌呤）。若难以避免上述规则，可考虑设计探针的互补链，例如：GTAGATGCCCCTAAT（可行，符合准则），GAACCTTCTATCTAG（可行，符合准则）。

为了避免自我互补序列，需避免反向重复、发夹和回文序列的出现。由于PNA/PNA的相互作用强于PNA/DNA，这些类型的探针容易聚合。四个碱基互补是可行的，但仅限于非C和G的组合。然而，如果它们被一个或多个碱基间隔，则也可以采用。例如：GATAATTGCA（可行，四个碱基互补），GATCCGGTAC（不可行，只有CCGG互补），TATCCTGGTA（可行，CC和GG之间隔开一个碱基）。若是六个及以上的碱基互补，则不可行。例如：CTATTAATGCA（不可行，六个碱基互补）。相对的，如果六个基因间隔开，而只包含C和G，也是不可行的。例如：AGTGCTACT（可行，因其有间隔），GCGGCTCGC（不可行，只有G和C互补）。即便是有间隔，八个碱基互补的情况也是不可行的，例如：ACTGTCAGT（不可行，八个碱基互补）。

一般规则：我们强烈推荐设计反向平行的PNA探针。PNA可以在任一方向形成双链，但反向平行的取向更为优先，形成最常见的双链构象。在反义和DNA探针类型应用中，反向平行的取向通常是最优选择。当PNA探针以反向平行的形式时，其N端对应于DNA的5’端。值得注意的是，PNA的熔点不同于DNA。由于PNA链不带电，PNA-DNA的Tm值通常高于相应的DNA-DNA。一般来说，在100mM NaCl溶液中，每增加一个碱基，其Tm值会提高约1°C。在较低盐浓度下，这一Tm值的差异更为明显。通常，含10个碱基的PNA，其Tm值约为50°C，而含15个碱基的PNA，则其Tm值约为70°C。长度在12至17个碱基的PNA序列是最佳选择，具体的序列长度主要依据应用需求而定。与DNA相比，PNA探针的序列长度通常更短，而较长的PNA链在具体序列上更容易聚合，难以纯化和表征。相对而言，更短的序列具有更强的特异性，因此对于短序列而言，不匹配的影响更大。

订购PNA的价格取决于序列长度、产量、纯度和修饰标记。请将您的具体需求发送给EVO视讯，我们会第一时间与您联系。最低订购量为：未标记的PNA为20 nmole，标记的PNA为10 nmole。我们提供90%和95%的纯度选择，并附带HPLC纯度分析和质谱分析报告。通常交货时间为2-3周，对gammaPNA或修饰标记的交货时间为3-4周。

精选引用：想了解使用EVO视讯的PNA所发表的研究文献吗？如《Exponential Increase in an Ionic Signal: A Dominant Role of the Space Charge Effect on the Outer Surface of Nanochannels》发表在Anal Chem上（2021年9月28日），所有单链PNA序列均由SBS Genetech Co., Ltd（北京，中国）购买；《Peptide Nucleic Acid-Functionalized Nanochannel Biosensor for the Highly Sensitive Detection of Tumor Exosomal MicroRNA》，发表在Anal Chem上（2021年7月30日），PNA由SBS Genetech Co., Ltd（北京，中国）合成；《Ultrasensitive Exosomal MicroRNA Detection with a Supercharged DNA Framework Nanolabel》，发表在Anal Chem上（2021年4月2日），含有五端的硫醇化PNA由SBS Genetech Co., Ltd（北京，中国）合成，所有序列均显示在表S1中。